江蘇省是我(wǒ)(wǒ)國生(shēng)豬主産區之一(yī),産業基礎良好,是全國生(shēng)豬産業重點建設區域[1],近年來養豬業迅速發展,規模化、集約化、标準化程度得到了進一(yī)步提升,然而制約産業發展的疫病風險,尤其是豬瘟、藍(lán)耳病和僞狂犬病等三種常見病毒性疾病的防控難度不斷增大(dà)[2]。多年的豬疫病防控實踐表明:單純使用疫苗很難長期控制住一(yī)種傳染病,還需要有科學的管理和監測手段,以達到有效評估疫苗免疫水平、科學制訂或動态調整免疫程序。爲了協助江蘇省部分(fēn)地市動物(wù)疫病預防控制中(zhōng)心做好疫病預警與免疫評估工(gōng)作,了解江蘇省部分(fēn)規模化豬場豬瘟、藍(lán)耳病、僞狂犬病三種豬病抗體(tǐ)水平和免疫狀況,同時爲校企合作單位的客戶提供相應的檢測服務、指導臨床免疫防治,江蘇農牧科技職業學院動物(wù)流行病學研究中(zhōng)心于2014年4月份—2016年3月份的2年時間裏共檢測了52個規模豬場3278份血清中(zhōng)的豬瘟、藍(lán)耳病、僞狂犬病抗體(tǐ),基于檢測結果的分(fēn)析爲規模化豬場有效防控這三種豬病提出了一(yī)些建議。
1材料
1.1血液樣品
采集于江蘇省部分(fēn)規模化豬場,自然析出血清或2500~3000r/min離(lí)心5min分(fēn)離(lí)血清,-20℃保存,待測。
1.2檢測試劑
豬瘟、豬藍(lán)耳病、豬僞狂犬病ELISA抗體(tǐ)檢測試劑盒,均購自美國IDEXX公司。
1.3主要儀器
自動酶标儀(型号爲SUNRISE),購自帝肯上海貿易有限公司;自動酶标洗闆機(型号爲DRW-320),購自無錫華衛德朗儀器有限公司;離(lí)心機(型号爲SIGMA2-5),購自Sigma公司;BRAND單道及8道移液器,購自普蘭德(BRAND)上海貿易有限公司。
2方法
檢測方法按照IDEXX檢測試劑盒使用說明書(shū)進行,結果按照試劑盒給出的條件進行判定。
3結果與分(fēn)析
3.1豬瘟抗體(tǐ)檢測結果
共檢測血樣3278份,按豬群不同階段統計陽性率(阻斷率≥40%),結果見表1。
由表1中(zhōng)數據可知(zhī),送檢樣品陽性率較低,主要集中(zhōng)在保育豬與育肥豬階段。育肥豬尤其是育肥中(zhōng)期不合格的樣本占較高比例,這就爲後期的豬瘟防控帶來了較高的壓力。從時間段上比較豬瘟抗體(tǐ)陽性率可以看出,2015-04—2016-03時間段總體(tǐ)抗體(tǐ)水平優于2014-04—2015-03時間段的抗體(tǐ)水平。
3.2藍(lán)耳病抗體(tǐ)檢測結果
共檢測血樣3132份,其中(zhōng)未做疫苗血樣209份,按豬群不同階段統計陽性率(S/P≥0.4),結果見表2;按S/P值統計不同階段豬隻所占比例,結果見圖1。
由表2中(zhōng)數據可知(zhī),藍(lán)耳病抗體(tǐ)陽性率最高的是種豬,其次爲保育豬,産房仔豬陽性率最低。保育豬藍(lán)耳病抗體(tǐ)陽性率較高的原因:一(yī)是經過了産房階段的免疫;二是保育階段的野毒感染。但試劑盒檢測并不能區分(fēn)是疫苗免疫造成的陽性率高還是野毒感染造成的陽性率高,兩個原因都可以造成較高的陽性率。
由圖1可知(zhī),S/P值在2.1~2.5之間時,保育豬所占比例最高,爲22.54%,其次是種豬,爲18.32%,仔豬最低,爲2.76%。S/P值在2.6~3.0之間時,種豬和保育豬所占比例分(fēn)别爲8.65%和8.36%,差異不顯著(P<0.05)。
3.3僞狂犬病抗體(tǐ)檢測結果
共檢測血樣3157份,其中(zhōng)檢測僞狂犬gB疫苗抗體(tǐ)3157份,檢測僞狂犬gI(gE)野毒抗體(tǐ)3123份。按豬群不同階段統計陽性率(S/N值≤0.6),結果見圖2。
由圖2可知(zhī),規模化豬場僞狂犬(gB)疫苗抗體(tǐ)水平普遍比較理想,但僞狂犬gI野毒抗體(tǐ)的檢測出率在部分(fēn)場和地區檢測出率較高,尤其是種豬和育肥豬,其陽性率分(fēn)别爲85.63%和78.80%。這個數據應該引起足夠的重視,有的豬場其種豬和育肥豬野毒陽性率竟高達100%,其中(zhōng)不乏一(yī)些新建的場。
4讨論與建議
4.1豬瘟的防控
從檢測結果看,豬瘟的免疫效果不是十分(fēn)理想。保育豬的豬瘟抗體(tǐ)水平較低,在55~60日齡二免前水平較低,是由于首次免疫後豬瘟抗體(tǐ)水平上升較慢(màn),在保育階段結束前(70日齡左右)允許有一(yī)定低水平的個體(tǐ)存在,原因是二免後抗體(tǐ)水平2周後可達較高效價。而育肥豬豬瘟抗體(tǐ)水平較低,原因則是多方面的,可從種豬是否存在持續性感染、免疫程序是否合理、疫苗的質量、免疫方法等方面查找原因,尤其要杜絕免疫失敗帶來的負面影響[3]。結合檢測數據與走訪調查發現,部分(fēn)豬場存在免疫不按規範操作且随意加大(dà)免疫劑量的情況,總是對疫苗的質量産生(shēng)懷疑,認爲大(dà)劑量可以使豬瘟的抗體(tǐ)水平一(yī)直增高而達到更好的免疫效果,殊不知(zhī)大(dà)的免疫劑量可以導緻機體(tǐ)對豬瘟疫苗的免疫麻痹,并不能誘導較高水平的豬瘟抗體(tǐ)[4]。此外(wài),免疫程序不合理也比較多見。有的豬場在保育舍做首免,有的是在産房前20d做首免,有的是超免,首免日齡最好根據母源抗體(tǐ)水平而定,并不是盲目地照搬,尤其是超免,在不能确保仔豬逐一(yī)免疫到位的情況下(xià),超免并不能起到好的效果,反而會造成了人力、物(wù)力、财力的浪費(fèi)。
建議豬場加強經産母豬的免疫,可實行跟胎免疫與普免相結合的方法,防止漏免,提高妊娠期間母源抗體(tǐ)水平,保證仔豬獲得足夠的母源抗體(tǐ)。同時,産房仔豬首免日齡應根據母源抗體(tǐ)水平而定,可以分(fēn)階段檢測仔豬的母源抗體(tǐ),如14,21,28日齡三次采血進行抗體(tǐ)檢測,确定首免日齡,間隔21~28d後進行二免。此外(wài),豬群處于亞健康狀态時不要注射疫苗,豬瘟疫苗最好是單獨免疫,以防與其他病毒性疾病疫苗間相互幹擾,影響抗體(tǐ)水平提升的速度。
4.2藍(lán)耳病的防控
根據IDEXX試劑盒大(dà)量檢測數據統計結果分(fēn)析來看,對于免疫經典疫苗種豬(公豬、後備公母豬、經産母豬),如果S/P值≥2.5,應暫停引入繁殖群。對于商(shāng)品豬,當0.4≤S/P≤2.0值才認爲是比較好的水平[5-6]。值得一(yī)提的是IDEXX試劑盒隻檢測藍(lán)耳病病毒的N蛋白(bái),反映的是豬群藍(lán)耳病毒的活躍程度,其S/P值的高低和陽性率與疫苗的保護性并不是正相關。檢測中(zhōng)也發現一(yī)個現象,同階段的豬群如
果藍(lán)耳病抗體(tǐ)S/P值較高,其豬瘟抗體(tǐ)阻斷率<40%(不合格)的概率較高。可以考慮是否有藍(lán)耳病野毒感染而幹擾了豬瘟疫苗的免疫效果。不過也不必過于擔心,仔細觀察豬群的健康狀況,如母豬是否流産、仔豬是否感染等再做進一(yī)步處理,豬群健康穩定是最重要的原則。此外(wài),在被檢的3132份血樣中(zhōng),有209份是沒有免疫過藍(lán)耳病疫苗的,但其陽性率也達到了32.33%,表明在當前普遍免疫藍(lán)耳病疫苗的趨勢下(xià),要想保持藍(lán)耳病陰性場,其防控壓力是相當大(dà)的。
建議豬場在加強種豬免疫的同時,定期檢測仔豬藍(lán)耳病母源抗體(tǐ)水平,制訂合理的免疫程序。在藍(lán)耳病病毒比較活躍的豬場要謹慎選擇疫苗,應隻選擇一(yī)種疫苗毒株進行免疫,不要經典毒株與高緻病性毒株同時使用。
4.3僞狂犬病的防控
僞狂犬病在當前的流行狀況下(xià)引起了不少養豬人的疑惑:疫苗免疫強度越來越高,很多豬場種豬的免疫已做到了一(yī)年普免4次,商(shāng)品豬做了滴鼻、二免甚至是三免,但采血檢測疫苗抗體(tǐ)水平較高且整齊度好,而野毒陽性率也較高。研究結果表明:僞狂犬病
毒變異後毒力增強了,疫苗的種類與當前流行毒株不匹配,疫苗的抗原濃度達不到規定的免疫劑量,人爲的免疫失敗以及生(shēng)物(wù)安全措施不到位等一(yī)系列原因值得我(wǒ)(wǒ)們深入思考與研究[7-8]。
建議豬場加強引種檢測,杜絕僞狂犬野毒抗體(tǐ)陽性的豬進場。同時制訂科學的淨化方案,每年2~3次(或每個季度1次)分(fēn)階段檢測僞狂犬疫苗抗體(tǐ)和野毒抗體(tǐ)水平,采樣群體(tǐ)以育肥豬和種豬爲主,尤其是種公豬也要全部檢測,及時淘汰胎齡高的母豬,根據結果或隔離(lí)淨化或淘汰(按用途)。選擇好的疫苗進行免疫,不要因爲免疫次數增多而選擇所謂便宜的産品來降低成本,其中(zhōng)的道理很簡單,能免3次解決問題的絕不免疫4次,這樣做既減少了豬群的免疫應激與免疫耐受,也節約了人力、物(wù)力與财力。對商(shāng)品豬沒有做二免的豬場,如果保育豬和育肥豬呼吸道問題較多,在做好藍(lán)耳病免疫的同時,可考慮做僞狂犬二免,尤其是在感染壓力大(dà)的情況下(xià),甚至要進行第三次僞狂犬疫苗免疫。
規模養殖是時代發展的必然趨勢[9],面對當前疫病流行的複雜(zá)狀況,如何采取有效的免疫預防和科學的診斷方法是動物(wù)健康養殖的需求,也是養豬人應該思考的問題。緊跟時代步伐,積極轉變養殖觀念,定期檢測不同階段豬群的抗體(tǐ)水平,動态調整免疫程序,确保豬群有較高的免疫水平及免疫整齊度,從而建立疫病的預警機制,不失爲明智的選擇。
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