自 2018 年 8 月非洲豬瘟首次在中(zhōng)國發現以來,一(yī)年多來非洲豬瘟給養豬業造成幾乎毀滅性的打擊,市民們深感菜籃子中(zhōng)豬肉之沉重,豬價及生(shēng)豬産業的發展多次出現在國家領導人的關注之下(xià)。各種鼓勵養豬政策不斷出台,各大(dà)研究院所專家及集團企業發布了諸多的複養方案,複養方案中(zhōng)豬場生(shēng)物(wù)安全的建設都會提高到最爲重要的環節,然而在針對非洲豬瘟壓力下(xià),消毒劑的選擇還存在不少謬誤,筆者就非洲豬瘟壓力下(xià)豬場的消毒劑選擇作一(yī)論述。
1. 非洲豬瘟病毒的特點
非洲豬瘟(ASF)是由非洲豬瘟的病毒(ASFV)感染家豬和野豬引起的一(yī)種烈性傳染病。非洲豬瘟病毒在脂質溶劑、洗滌劑、氧化劑裏面很容易失活,比如次氯酸鹽和苯酚。如 ASFV 與 2.3% 的氯和3% 的鄰苯基苯酚,或者合成的碘溶液接觸 30min 就會失活。其他使ASFV 失活的有效措施包括福爾馬林、氫氧化鈉等。總之,肥皂水、洗滌劑、堿性物(wù)質對畜舍、器具、衣物(wù)、工(gōng)具、人類居所等消毒非常有效。飛機上的消毒劑推薦使用衛可。被病毒污染的飼料、飲水和肥料應被掩埋或焚燒。被 ASFV 污染豬糞可用 1% 氫氧化鈉或氫氧化鈣4 ℃處理 3 min 或 0.5% 濃度處理30 min。ASFV 在 pH 4 ~ 10 的溶液中(zhōng)比較穩定,但在 pH 小(xiǎo)于 4 或大(dà)于 11.5 的條件下(xià),并且培養基中(zhōng)不含血清會立刻失活 ;在 25% 的含有血清的培養基,且 pH 爲 13.4的條件下(xià)可以存活數天 ;5 ℃的血清中(zhōng)可以存活 6 年以上。非洲豬瘟病毒對溫度敏感,在 60 ℃的條件下(xià)持續 30 min,或者 56 ℃持續70 min 都能滅活 ;在豬的糞便中(zhōng)保持感染性能達到數周,在腐敗的血液中(zhōng)可存活 15 周,在室溫保存的血清或血液中(zhōng)可存活 18 個月。
總之,ASFV 是有囊膜病毒,沒有有機物(wù)保護是很容易被滅活,但在有機物(wù)保護下(xià),該病毒對環境及消毒劑抵抗力又(yòu)變得很強大(dà),養殖場環境中(zhōng) ASFV 總是被有機物(wù)保護,消毒劑選擇必須考慮到這一(yī)點。
2 消毒的定義及效果影響因素
2.1 消毒與滅菌的區别
消毒與滅菌是不同數量級的清除殺滅微生(shēng)物(wù)的概念。
消毒是指殺滅或去(qù)除外(wài)環境中(zhōng)各種病原微生(shēng)物(wù),目标是達到無害化的過程。正常消毒的标準要求是微生(shēng)物(wù)滴度降低量達到 103 量級就可以,即消毒的結果是殺滅或者清除微生(shēng)物(wù)達到 99.9% 就是符合消毒要求。若用消毒對象污染的自然微生(shēng)物(wù)的殺滅率來評定消毒效果,一(yī)般以殺滅或清除率達到 90% 爲合格。
滅菌是指殺滅或去(qù)除外(wài)環境中(zhōng)一(yī)切微生(shēng)物(wù)(包括且不限于病原微生(shēng)物(wù))的過程。因此目前國際上規定,滅菌過程必須使滅菌物(wù)品污染的微生(shēng)物(wù)的存活概率降低到 10-6。而針對非洲豬瘟這個特定疫病的危害嚴重性,顯然常規的消毒标準是不适合的,針對非洲豬瘟病毒的殺滅要力争采用滅菌級的标準。
2.2 消毒效果的幾個影響因素
2.2.1 化學消毒劑的特性
1)化學消毒劑的種類
消毒劑的選擇必須針對要處理或者消滅的微生(shēng)物(wù)的特點來确定,例如細菌芽孢或者非囊膜病毒必須選用滅菌級消毒劑,選用低效消毒劑(單鏈季铵鹽)效果就很差。非洲豬瘟病毒爲有囊膜病毒,在沒有有機物(wù)保護的裸病毒時很容易被季胺鹽類滅活,10% 癸甲溴铵稀釋3200 倍,20 ℃,作用 10 min 病毒滴度降低 3.6 Log。 2)消毒劑的配方優異的消毒劑配方能顯著提高消毒效果。複方消毒劑的代表産品是衛可(Virkon® S),其主要成分(fēn)是過硫酸氫鉀複合物(wù)能産生(shēng)生(shēng)物(wù)殺滅劑——高活性氧 ;偏磷酸鹽能中(zhōng)和硬水中(zhōng)的金屬離(lí)子 ;烷基苯磺酸鈉起到表面活性劑作用,濕潤消毒物(wù)體(tǐ)表面 ;蘋果酸能降低 pH,增效生(shēng)物(wù)殺滅劑 ;氨基磺酸降低 pH,氧化因子和氯化鈉通過化學反應産生(shēng)氯化因子,綜合具有“氧化、氯化、酸化”三合一(yī)功效,并佐劑成分(fēn)有效去(qù)除了有機物(wù)和硬水的影響,有效性的顔色指示劑。複配後成效顯著 :殺菌譜廣,性質穩定,速效,可在低溫下(xià)使用,不易受有機物(wù)、酸、堿及其他物(wù)理、化學等因素的影響,對金屬器械無腐蝕,無毒無殘留,溶于水能飲用。 3)消毒劑的濃度劑量消毒劑的濃度劑量是操作過程中(zhōng)的基本條件之一(yī)。首要是保障消毒劑的劑量,在配比濃度時一(yī)般都是以有效成分(fēn)淨含量來進行配比,不正規生(shēng)産企業标簽中(zhōng)往往有陷阱,導緻配比濃度往往達不到應有比例。
2.2.2 外(wài)界因素
1)環境溫度
總所周知(zhī),大(dà)部分(fēn)消毒劑随着溫度的降低,活性下(xià)降,溫度越高消毒劑效率越好。溫度高低對消毒效果的影響,往往随消毒方法、化學成分(fēn)及微生(shēng)物(wù)種類不同而不同。例如,戊二醛在低溫的使用效果就不如在高溫的使用效果,因此低溫季不建議使用戊二醛。
2)環境相對濕度
氣霧噴霧消毒和熏蒸消毒受環境相對濕度的影響十分(fēn)明顯,環境中(zhōng)的濕度過大(dà)會降低消毒劑的濃度,直接導緻消毒劑效果失效。例如甲醛熏蒸消毒的最佳相對濕度爲80% ~ 90%。
3)消毒劑的作用時間
國标中(zhōng)評價消毒劑的作用時間一(yī)般爲 30 min,可是現場操作中(zhōng)往往達不到 30 min,直接導緻消毒劑對微生(shēng)物(wù)的殺滅效果下(xià)降,例如部分(fēn)消毒池人經過時不到 1 min,這種即時接觸是達不到效果的,而對這方面的研究國内還較少。
4)消毒時環境的酸堿度
酸堿度的變化對消毒的效果影響很大(dà) :一(yī)方面部分(fēn)消毒劑隻有在特定的酸或堿環境中(zhōng)才有效 ;另一(yī)方面酸堿環境中(zhōng)微生(shēng)物(wù)的存活強度也不同。例如 ASFV 在 pH 4 ~ 10的溶液中(zhōng)比較穩定,但在 pH 小(xiǎo)于 4或大(dà)于 11.5、不含血清的培養基中(zhōng)ASFV 會立刻失活。
5)表面活性和稀釋用水的水質
在使用表面活性劑消毒時應格外(wài)小(xiǎo)心,例如陰離(lí)子表面活性劑會影響單鏈季铵鹽類的消毒作用 ;例如部分(fēn)地區的硬水(水中(zhōng)含鈣、鎂離(lí)子高)等也容易消耗消毒劑的消毒成分(fēn)。
6)有機物(wù)質類的幹擾
養豬場的環境中(zhōng)會殘留大(dà)量的有機物(wù),例如蛋白(bái)質、尿液、血液、油脂等物(wù)質,這類物(wù)質不但是微生(shēng)物(wù)的保護傘,還會消耗化學消毒劑,容易使消毒劑與有機物(wù)質産生(shēng)化學反應,導緻消毒效果的下(xià)降。例如普通的氯制劑、季铵鹽及過氧化物(wù)類的消毒劑受有機物(wù)幹擾比較明顯,醛制劑受有機物(wù)的影響相對較小(xiǎo)。因此,在消毒前,建議先做消毒對象表面的清理和清潔工(gōng)作,清除消毒對象的表面有機物(wù)和生(shēng)物(wù)膜。同時要注意選擇消毒劑有效性測試時的模拟現場的有機物(wù)的環境。
7)滲透性
消毒環境的表面往往是凹凸不平的,而且還存在大(dà)量的縫隙,作爲消毒劑必須要能夠滲透到所有消毒物(wù)品的表面,達到消毒的全方位。不同消毒劑的滲透性不同,例如用作熏蒸時甲醛蒸汽比環氧乙烷穿透力差。優秀的消毒劑必須具備很強的滲透有機物(wù)表面的能力。
8)消毒設備在實際的畜牧生(shēng)産過程中(zhōng),消毒都是借助消毒設備來實現。消毒設備對消毒效果的影響主要是,噴霧霧滴的大(dà)小(xiǎo),霧滴的懸浮時間,一(yī)般來說,霧滴越小(xiǎo),懸浮時間越長,和有害微生(shēng)物(wù)的接觸時間越久,消毒效果就越好。
9)微生(shēng)物(wù)種類特性和數量級
因爲不同微生(shēng)物(wù)的自身特性對不同類型的消毒劑的抗性也不同,因此消毒劑選擇還要考慮環境中(zhōng)的主要微生(shēng)物(wù)的種類和數量級,污染嚴重和高數量級的環境必須選擇高效的消毒劑。
3 非洲豬瘟壓力下(xià)豬場消毒劑選擇要點
3.1 殺滅非洲豬瘟病毒的消毒劑概述
世界動物(wù)衛生(shēng)組織(Office International Des Epizooties OIE) 建議對 AFSV 可使用 0.8% 氫氧化鈉、2.3% 次氯酸鹽、0.3% 福爾馬林、3% 鄰苯基苯酚和碘混合物(wù)進行消毒,但均需作用 30 min 可滅活病毒。農業農村(cūn)部推薦的防控非洲豬瘟的消毒劑見表 1。
3.2 非洲豬瘟壓力下(xià)選擇消毒劑的要點
3.2.1 注重消毒“藥”的概念
不同的消毒“ 藥 ” 對 ASHV殺滅比例也存在着極大(dà)差異,非瘟壓力下(xià)選擇消毒“藥”也需要根據 ASFV 的特點選擇有效的産品。 除了有效外(wài)還要考慮殺滅的程度,據中(zhōng)國獸醫協會編寫的《 非洲豬瘟知(zhī)識手冊 》, 國外(wài)有實驗室用高毒力或中(zhōng)等毒力的 ASFV 感染豬隻後,血液中(zhōng)最高病毒滴度可達 109HAD50/mL,口腔液、尿液和糞便中(zhōng)最高滴度可達 105HAD50/mL。另有研究表明,水是非常快速的感染途徑,在水裏面含量隻要有一(yī)個 TCID50 就會引起感染。因此對防控 ASFV 飲水消毒不能是有效,而是要滅菌級。
3.2.2 注重“用藥量”的概念
上面所提到消毒劑需要合理的配比比例,确保有效的問題 ;對于現場用量來說,還需要考慮豬舍的空間和面積,例如空舍消毒按地面面積 ×2.5 作爲整棟舍的面積,牆 面、天花闆、地面的消毒藥的用量 爲 300 ml/m2, 噴霧消毒 40~80 ml/m2(注意消毒霧滴大(dà)小(xiǎo))。
3.2.3 綜合各方面因素,準确用“藥”
從表 2 可以看出針對非洲豬瘟病毒,消毒劑的種類不同、使用劑量、作用時間、環境溫度及有機物(wù)污染等,造成病毒滴度降低量差異顯著,生(shēng)産上可根據消毒的對象和目的,選擇合适的比例。如人穿雨鞋在腳踏盆消毒,考慮有機物(wù)幹攏,如停留時間短于 1 min,可以選擇1∶100 衛可 ;如停留 10 min,則可按 1∶800 稀釋。另 ASFV 在有機物(wù)存在下(xià)抗力增強,所以在消毒前清洗就更爲重要。
3.2.4 高效消毒劑定義有别于養豬生(shēng)産中(zhōng)高效的消毒劑
化學消毒劑可分(fēn)爲高效、中(zhōng)效和低效消毒劑。高效消毒劑能殺滅包括細菌芽孢和真菌孢子在内的外(wài)界環境中(zhōng)的各種微生(shēng)物(wù)的消毒劑,又(yòu)稱滅菌劑。例如,在化學消毒劑的劃分(fēn)上,醛類是高效消毒劑,因爲 2% 戊二醛 30 min 可以殺滅破傷風的芽孢 ;針對非洲豬瘟病毒,某醛制劑産品(12.74% 戊二醛 +4.84% 癸甲氯铵)在 20 ℃、1%有機物(wù)中(zhōng)加磷酸緩沖液(pbs)作用 30 min,稀釋比例爲 1∶50,非洲豬瘟病毒滴度降低量爲 4.6 log。如生(shēng)産中(zhōng)使用國内常見的一(yī)種 2% 的稀戊二醛則濃度理論上至少應該爲1∶8 稀釋,而且非複方的顯然影響滅活效果。因此高效消毒劑隻是代表其主要成分(fēn),在生(shēng)産實踐中(zhōng)還因考慮多種因素。
3.2.5 要了解産品主要成分(fēn)和特性,避免盲目使用
生(shēng)産中(zhōng)要了解産品性能,除了對 ASFV 有效,同時要根據表 3 避免用刺激性強的消毒劑進行帶豬消毒,若使用不當會刺激豬的眼睛、呼吸道黏膜,豬的呼吸道黏膜受損會讓 ASFV 更容易入侵豬體(tǐ)。
3.3 豬場消毒工(gōng)作前要進行清理和清潔工(gōng)作
由于豬舍存在如灰塵、糞便、尿液及血液等大(dà)量有機物(wù),這些有機物(wù)大(dà)大(dà)提高了非洲豬瘟病毒對環境的抗性,消毒前使用專用的泡沫清洗劑有利于提高消毒效果。
4 非洲豬瘟消毒效果評價
中(zhōng)國農業科學院蘭州畜牧與獸醫研究所編制《非洲豬瘟防控清潔消毒技術要點》,列出非洲豬瘟消毒效果評價方案。
1)設置消毒指示微生(shēng)物(wù)評價消毒效果
消毒前,将枯草杆菌芽孢塗于棉布或紗布,作爲消毒指示微生(shēng)物(wù),置于待消毒場所。消毒結束後,檢測芽孢殺滅率。殺滅率達到 99.9%以上,判定消毒合格。
枯草杆菌芽孢抗性是強于朊病毒(瘋牛病病原)以外(wài)的所有微生(shēng)物(wù),非洲豬瘟病毒是有囊膜病毒,對消毒劑抗力較弱,故可以枯草杆菌芽孢作爲消毒指示微生(shēng)物(wù)評價滅殺非洲豬瘟病毒的效果。
2)檢測非洲豬瘟病毒評價消毒效果
消毒後,在養殖場、交易市場、屠宰場、無害化處理場點、疫區臨時檢查站點等高風險場所,采集樣品,并進行非洲豬瘟病毒的檢測。針對病毒消毒效果的評價方法主要包括分(fēn)子生(shēng)物(wù)學評價法和細胞培養評價法,養殖場隻能采用分(fēn)子生(shēng)物(wù)學評價法,但由于被滅活病毒的核酸有可能檢測出陽性,存在假陽性現象。
3) 采用哨兵豬來評價消毒成效
恢複生(shēng)産前,可以選擇 10 ~20 頭非洲豬瘟陰性健康的豬,作爲“哨兵”,進場自由活動 30d,并每天觀察臨床症狀,采集樣品進行檢測,确保豬場消毒徹底衛生(shēng)。
2008 年 FAO / OIE /世界銀行發布了針對養殖業的生(shēng)物(wù)安全(Biosecurity) 的定義是 :爲降低病原體(tǐ)傳入和散布風險而實施的措施。生(shēng)物(wù)安全的中(zhōng)心思想是隔離(lí)、消毒和防疫。應用到非洲豬瘟防控的方案就是隔離(lí)和消毒,消毒需要根據現場環境和消毒劑等綜合因素進行考慮,選擇好消毒劑,規範使用 ,才能建立起針對非洲豬瘟的生(shēng)物(wù)安全網。
(參考文獻:略)
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